自噬相关基因LC3B真核表达载体构建及胃癌细胞自噬的观察

• 作者: 沈薇 赵慧 隋璐
• 来源期刊: 沈阳医学院学报
• 学科: 医学
• 关键词: 微管相关蛋白1轻链3B 自噬 基因表达 MKN1细胞 转染
• 年，卷（期）: 2014,（4）
• 所属期刊栏目: 基础医学与临床医学研究
• 页码范围: 199-201
• 页数: 3页
• 分类号: R541
• 字数: 2560字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1008-2344.2014.04.002

摘要

目的:构建人自噬相关基因微管相关蛋白1轻链3B(microtubule associated protein 1 light chain 3B,LC3B)真核表达载体,并鉴定其生物学功能.方法:通过RT-PCR方法扩增得到人LC3B cDNA,应用基因重组技术构建pEGFP-C1-LC3B真核表达载体,通过酶切和测序进行鉴定.将pEGFP-N1-LC3B表达载体转染胃癌细胞MKN1,倒置荧光显微镜观察饥饿诱导后细胞中EGFP-LC3B的表达及分布变化.结果:通过测序鉴定,pEGFP-N1-LC3B真核表达载体序列正确,编码框正确.转染后的MKN1细胞经饥饿诱导后,检测发现EGFP-LC3B由散在分布向点状分布改变,即生成细胞自噬体.结论:成功构建了人自噬相关基因LC3B真核表达载体,并证实饥饿诱导胃癌细胞自噬的发生,为进一步研究自噬在肿瘤中的作用机制奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	隋璐	沈阳医学院基础医学院病理生理学教研室	27	101	5.0	8.0
2	沈薇	沈阳医学院基础医学院病理生理学教研室	28	105	6.0	8.0
3	赵慧	沈阳医学院基础医学院机能实验中心	5	5	1.0	2.0