LC3真核表达载体构建及其在293T细胞中自噬诱导研究

• 作者: 卢春花 卢洁 施洁 李游 游金
• 来源期刊: 广西科学
• 学科: 生物学
• 关键词: LC3 细胞自噬 绿色荧光蛋白 人胚肾293T细胞
• 年，卷（期）: 2018,（3）
• 所属期刊栏目: 实验研究类
• 页码范围: 313-317,324
• 页数: 6页
• 分类号: Q291
• 字数: 4340字
• 语种: 中文
• DOI: 10.13656/j.cnki.gxkx.20180528.005

摘要

[目的]构建 pEGFP-N1-LC3 真核表达载体,并将其转染进人胚肾细胞 293T,通过 Earle's 盐平衡液(Bal-anced salt solution,EBSS)饥饿诱导观察细胞自噬现象.[方法]RT-PCR扩增 LC3 基因,并将其插入 pEGFP-N1真核表达载体构建重组质粒.将重组质粒转染至人胚肾细胞 293T,显微镜观察、Western blot检测 GFP-LC3 融合蛋白表达情况.对转染细胞进行 Earle's 盐平衡液饥饿诱导,通过 Western blot验证自噬指标,激光共聚焦显微镜观察自噬泡形成.[结果]成功构建 pEGFP-N1-LC3 真核表达载体,并在 293T 细胞中成功表达目的蛋白,在进行 Earle's 盐平衡液饥饿诱导后观察到自噬泡的形成,Western blot 检测到 LC3-Ⅰ向 LC3-Ⅱ的转化.[结论]本实验为研究自噬在癌细胞病理进程中的机制提供了实验素材.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	卢洁	广西大学生命科学与技术学院	53	522	13.0	21.0
2	李游	广西大学生命科学与技术学院	8	14	3.0	3.0
3	卢春花	广西大学生命科学与技术学院	11	47	3.0	6.0
4	游金	广西大学生命科学与技术学院	2	3	1.0	1.0
5	施洁	广西大学生命科学与技术学院	2	0	0.0	0.0