日本血吸虫TOR真核表达载体的构建及其在293T细胞中的表达

• 作者: 傅志强 宰金丽 张倩 林矫矫 柴淑梅 王涛 贾秉光 马帅
• 来源期刊: 中国动物传染病学报
• 学科: 农学
• 关键词: 日本血吸虫 TOR蛋白 基因克隆 真核表达
• 年，卷（期）: 2017,（1）
• 所属期刊栏目: 寄生虫
• 页码范围: 66-71
• 页数: 6页
• 分类号: S852.735
• 字数: 3496字
• 语种: 中文

摘要

本研究扩增到日本血吸虫SjTOR完整的蛋白编码区并将其克隆到pXJ40-FLAG载体的HindⅢ、Xho Ⅰ酶切位点,构建真核表达质粒pXJ40-FLAG-TOR.将测序正确的质粒转染到293T细胞中进行表达,然后应用间接免疫荧光、实时荧光定量PCR、Western blot检测其在293T细胞中的表达情况.测序结果表明SjTOR蛋白编码区为1245 bp,真核表达质粒pXJ40-FLAG-TOR构建成功.转染293T细胞48 h后,应用间接免疫荧光染色可观察到转染重组质粒的细胞有特异性绿色荧光,空质粒对照则未见.实时荧光定量PCR结果显示,在转染质粒pXJ40-FLAG-TOR 6 h后SjTOR蛋白的基因已有转录,至转染24 h时转录水平最高,随后开始降低.Western blot结果显示SjTOR蛋白分子量约53 kDa,可被FLAG单抗和抗jTOR-ED1抗血清识别.结果表明SjTOR蛋白可以在293 T细胞中表达,为进一步研究SjTOR蛋白的生物学功能和DNA疫苗打下了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	傅志强	中国农业科学院上海兽医研究所	22	122	5.0	10.0
2	林矫矫	中国农业科学院上海兽医研究所	56	456	11.0	20.0
3	王涛	中国农业科学院上海兽医研究所	48	1074	16.0	32.0
4	张倩	中国农业科学院上海兽医研究所	25	255	8.0	15.0
5	马帅	中国农业科学院上海兽医研究所	28	242	8.0	15.0
6	柴淑梅	中国农业科学院上海兽医研究所	3	3	1.0	1.0
7	宰金丽	中国农业科学院上海兽医研究所	2	3	1.0	1.0
8	贾秉光	中国农业科学院上海兽医研究所	1	2	1.0	1.0