小鼠Atrogin-1基因真核表达载体的构建及其在293T细胞中的表达

• 作者: 吴国豪 张波 袁磊
• 来源期刊: 中国临床医学
• 学科: 生物学
• 关键词: Atrogin-1 真核表达载体 癌性恶液质
• 年，卷（期）: 2009,（5）
• 所属期刊栏目: 临床基础研究
• 页码范围: 662-664
• 页数: 3页
• 分类号: Q782
• 字数: 2287字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1008-6358.2009.05.003

摘要

目的:构建小鼠Atrogin-1基因真核表达载体,研究其功能,并探讨其在癌性恶液质骨骼肌萎缩中的作用机制.方法:提取小鼠C2C12细胞RNA,反转成cDNA,PCR合成含有酶切位点的Atrogin-1 cDNA全长,酶切后连接到真核表达载体pcDNA3.1, 构建重组真核表达载体pcDNA3.1-Atrogin-1, 经鉴定及测序证实cDNA片段大小和序列正确,然后用其转染293T细胞,Western blot法检测Atrogin-1蛋白的表达.结果:pcDNA 3.1-Atrogin-1含大小、序列正确的Atrogin-1cDNA片段,转染pcDNA3.1-Atrogin-1的293T细胞裂解液中能检测到Atrogin-1蛋白高表达.结论:成功构建了Atrogin-1基因真核表达载体pcDNA 3.1-Atrogin-1,并在真核细胞中表达了目的蛋白,其是研究癌性恶液质的重要工具.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	吴国豪	复旦大学附属中山医院普外科	119	1146	18.0	29.0
2	袁磊	复旦大学附属中山医院普外科	14	124	6.0	11.0
3	张波	复旦大学附属中山医院普外科	31	455	6.0	21.0