pIRES2-EGFP-LR真核表达载体的构建及其在293T细胞中的表达

• 来源期刊: 中国兽医科学
• 学科: 生物学
• 关键词: 层黏蛋白受体 真核表达载体 转染
• 年，卷（期）: 2009,（9）
• 所属期刊栏目: 基础兽医学
• 页码范围: 817-820
• 页数: 4页
• 分类号: Q51|Q786
• 字数: 3330字
• 语种: 中文

摘要

为探讨层黏蛋白受体的生理功能及其在疾病发生、发展过程中的作用,以培养的SD大鼠大脑皮质神经元的总RNA为模板,运用RT-PCR方法扩增了SD大鼠层黏蛋白受体基因.将其克隆到pMD18-T载体中,经酶切纯化后再将其亚克隆到带有加强型绿色荧光蛋白报告基因的pIRES2-EGFP真核表达栽体中,对重组质粒pIRES2-EGFP-LR进行酶切和测序鉴定后,采用阳离子脂质体转染法将重组质粒转染到293T细胞,荧光显微镜和激光共聚焦显微镜观察其表达情况.结果表明,真核表达载体pIRES2-EGFP-LR构建成功并可以在293T细胞中表达.该表达载体可以作为研究层黏蛋白受体生理功能的重要工具.