鼠抗人B7-H4单克隆抗体的制备及其生物学特性鉴定

• 作者: 傅丰庆 吴鸿雅 张光波 李晓晨 胡玉敏 虞培娟 赵娟 陈瀚卿 高菲
• 来源期刊: 现代免疫学
• 学科: 医学
• 关键词: B7-H4 单克隆抗体 杂交瘤
• 年，卷（期）: 2014,（5）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 413-417
• 页数: 5页
• 分类号: R392.11
• 语种: 中文

摘要

研制鼠抗人B7-H4单克隆抗体,并对其生物学特性进行初步研究.采用稳定高表达B7-H4分子的基因转染细胞株293T/B7-H4为免疫原免疫Balb/c小鼠,通过杂交瘤技术融合、流式细胞术筛选和克隆化培养后,最终获得一株鼠抗人B7-H4单克隆抗体(mAb),建立了稳定的杂交瘤细胞株;采用快速试纸条定性法鉴定其抗体亚型,通过western blot和细胞免疫组化鉴定其识别特异性,并与商品化抗人B7 H4抗体(美国BioLegend,克隆号MIH43)进行位点竞争;T细胞体外增殖抑制实验初步鉴定其生物学特性.成功获得的杂交瘤细胞株命名为2B7;快速试纸条鉴定其Ig亚型为IgG1,K链;western blot和细胞免疫组化结果显示,2B7能特异性识别B7-H4分子;位点竞争实验表明,2B7与商品化抗体MIH43识别不同的抗原表位.生物学功能实验结果显示,2B7能阻断B7-H4对T细胞体外增殖的抑制效应.单克隆抗体2B7的成功研制,为深入研究B7 H4的生物学功能和临床应用提供了有价值的工具.