恶性疟原虫裂殖子表膜蛋白MSPDBL2-DBL2结构域的克隆表达和抗原性分析

• 作者: 仰梦佳 王素蓉 诸葛洪祥 陈军虎
• 来源期刊: 中国寄生虫学与寄生虫病杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 恶性疟原虫 裂殖子 原核表达 抗原性
• 年，卷（期）: 2014,（5）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 357-360
• 分类号: R384.4
• 语种: 中文

摘要

目的 克隆、表达恶性疟原虫(Plasmnodium falciparum)疫苗候选分子-裂殖子表膜蛋白MSPDBL2(PF10_0355)的DBL2结构域,并分析其抗原性.方法 PCR扩增实验室培养的恶性疟原虫标准株3D7的基因组DNA,采用无缝克隆技术快速连接目的片段和质粒载体,构建重组表达质粒pET28a-DBL2,转化至大肠埃希菌BL2l(DE3)中,异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达并经亲和层析获得纯化的重组蛋白rDBL2.分别以恶性疟患者血清、健康者血清、恶性疟患者混合血清和健康者混合血清作为一抗,蛋白质印迹(Western blotting)分析该重组蛋白的抗原性.结果 PCR扩增恶性疟原虫疫苗候选分子-裂殖子表膜蛋白MSPDBL2的DBL2基因,获得长约950 bp片段,与理论值相符.菌落PCR鉴定和测序结果均显示,重组质粒pET28a-DBL2构建成功.十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)结果显示,经IPTG诱导并经亲和层析纯化后获得相对分子质量(Mr)约为34 000的包涵体蛋白.Western blotting分析结果显示,重组蛋白rDBL2可被恶性疟患者血清识别,而与健康者血清无特异反应.结论 克隆和表达了恶性疟原虫裂殖子表膜蛋白MSPDBL2-DBL2结构域,重组蛋白rDBL2有良好的抗原性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	诸葛洪祥	苏州大学基础医学与生命科学学院	57	298	10.0	13.0
2	王素蓉	苏州大学基础医学与生命科学学院	2	5	1.0	2.0
3	仰梦佳	苏州大学基础医学与生命科学学院	1	0	0.0	0.0