H5N1亚型禽流感病毒缺失跨膜区M2基因的原核表达及其单克隆抗体的制备

• 作者: 刘开春 刘秀梵 彭大新 柴茂 管萌 许晨旭 陈素娟
• 来源期刊: 中国兽医科学
• 学科: 农学
• 关键词: H5N1 亚型禽流感病毒 M2基因 单克隆抗体
• 年，卷（期）: 2014,（2）
• 页码范围: 182-186
• 页数: 5页
• 分类号: S852.659.5
• 语种: 中文

摘要

为制备针对H5N1亚型禽流感病毒(AIV) M2蛋白的单克隆抗体,将H5N1亚型AIV缺失跨膜区的M2基因(sM2)克隆至原核表达载体pGEX-6P-1,通过IPTG诱导表达,获得可溶性的36 ku sM2融合蛋白.以100 μg纯化的sM2融合蛋白免疫8周龄BALB/c小鼠,取脾细胞与骨髓瘤细胞SP2/0融合.以sM2融合蛋白作为包被抗原,通过ELISA方法检测,将M2融合蛋白抗原检测阳性、GST抗原检测阴性的杂交瘤细胞进行克隆筛选,获得4株单克隆抗体,分别被命名为1A9、2D4、3E6和4E7,亚类分别为IgG2b、IgG1、IgG2a、IgG2a.间接免疫荧光试验显示,单克隆抗体与不同clade的H5亚型AIV感染的MDCK细胞均产生特异性荧光反应,可用于H5亚型AIV的检测.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘秀梵		373	3732	28.0	39.0
2	彭大新		133	1222	21.0	28.0
3	陈素娟		54	295	11.0	15.0
4	柴茂		1	0	0.0	0.0
5	许晨旭		2	15	1.0	2.0
6	管萌		3	15	1.0	3.0
7	刘开春		2	3	1.0	1.0