α-1,2岩藻糖基转移酶基因682A＞G和547_552delAG突变对酶功能活性的影响

• 作者: 何吉 吕杭军 和艳敏 朱发明 洪小珍 许先国 陶苏丹
• 来源期刊: 中华医学遗传学杂志
• 关键词: α-1,2岩藻糖基转移酶基因 突变 转录分析 酶活性
• 年，卷（期）: 2014,（5）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 591-594
• 页数: 4页
• 字数: 3150字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.1003-9406.2014.05.011

摘要

目的 研究α-1,2岩藻糖基转移酶基因(α-1,2 fucosyltransferase,FUT1)682A＞G和547_552delAG突变对FUT1转录和表达蛋白功能活性的影响.方法 构建FUT1 682A＞G和FUT1 547_552delAG真核重组表达质粒,并转染COS7细胞进行稳定表达细胞株筛选.实时荧光定量PCR检测FUT1 mRNA表达量,高效液相色谱检测FUT1酶的活性.结果 获得稳定表达FUT1 682A＞G、FUT1547_552delAG和FUT1野生型基因的COS7细胞,FUT1 682A＞G和547_552delAG重组体mRNA含量分别为野生型的101.69％和102.79％.聚丙烯酰胺凝胶电泳和Western印迹检测显示FUT1 682A＞G重组体细胞表达相对分子质量约为46 000的目的蛋白片段,而FUT1 547_552delAG重组体细胞未见同分子量大小的目的蛋白片段.酶活性分析显示FUT1 682A＞G重组体蛋白酶活性为野生型的61.06％,而547_552delAG重组体蛋白完全失去酶活性.结论 FUT1 682A＞G和547_552delAG突变不影响FUT1mRNA转录,但不同FUT1突变点对酶活性影响存在明显差异.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	和艳敏	浙江省血液中心卫生部血液安全研究重点实验室	13	41	3.0	6.0
2	陶苏丹	浙江省血液中心卫生部血液安全研究重点实验室	7	21	2.0	4.0
3	朱发明	浙江省血液中心卫生部血液安全研究重点实验室	108	522	13.0	18.0
4	何吉	浙江省血液中心卫生部血液安全研究重点实验室	35	141	6.0	10.0
5	洪小珍	浙江省血液中心卫生部血液安全研究重点实验室	35	279	12.0	15.0
6	许先国	浙江省血液中心卫生部血液安全研究重点实验室	52	370	13.0	17.0