PD-1抗体表达载体的构建以及其功能的探究

• 作者: 朱海莉 钱其军 陶雷 黎江
• 来源期刊: 浙江理工大学学报（自然科学版）
• 学科: 生物学
• 关键词: CTL PD-1抗体 抗肿瘤 免疫细胞治疗 免疫抑制
• 年，卷（期）: 2014,（6）
• 所属期刊栏目: 生物与生命科学
• 页码范围: 697-701
• 页数: 5页
• 分类号: Q255
• 字数: 2859字
• 语种: 中文

摘要

通过构建含PD-1抗体基因的重组腺病毒表达载体Ad35-anti-PD-1,表达的PD-1抗体以探究其对细胞毒性T淋巴细胞(cytotoxic T lymphocyte,CTL)抗肿瘤功能的影响.用ELISA实验检测Ad35-anti-PD-1在293细胞中PD-1抗体的表达量;利用Protein G亲和层析法纯化PD-1抗体;通过体外杀伤实验研究PD-1抗体阻断PD-1信号通路的CTL杀伤肝癌细胞能力的变化.显示成功构建重组腺病毒载体Ad35-ami-PD-1,滴度为1×1010 pfu/mL;ELISA实验检测在72h时293细胞上清中PD-1抗体的表达量约在600 ng/mL; Westernblotting实验证明PD-1抗体包含正确的重链(50 kD)和轻链(25 kD);ELISA实验检测从100 mL细胞上清中得到1mL浓度在40 μg/mL的PD-1抗体;体外杀伤实验证明CTL在添加PD1抗体的环境中杀伤肝癌细胞的能力显著增强.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	钱其军	浙江理工大学生命科学学院新元医学与生物技术研究所	106	367	10.0	15.0
5	陶雷	浙江理工大学生命科学学院新元医学与生物技术研究所	2	12	1.0	2.0
6	黎江	第二军医大学东方肝胆外科医院病毒基因治疗实验室	1	0	0.0	0.0
7	朱海莉	第二军医大学东方肝胆外科医院病毒基因治疗实验室	1	0	0.0	0.0