克伦特罗单克隆抗体的纯化及其生物学特性的研究

• 作者: 刘楠 宁保安 李晓丽 欧国荣 马新华 高志贤
• 来源期刊: 中国应用生理学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 克伦特罗 单克隆抗体 性质 鉴定 酶联免疫吸附分析法
• 年，卷（期）: 2014,（5）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 413-416
• 页数: 4页
• 分类号: R363
• 字数: 2973字
• 语种: 中文
• DOI: 10.13459/j.cnki.cjap.2014.05.008

摘要

目的:将自制克伦特罗(CL)单克隆抗体纯化并研究其生物学特性,进行性质鉴定并建立检测标准曲线.方法:用ELISA法测定克伦特罗单克隆抗体的亲和常数和抗体活性,ELISA测定单克隆抗体与BSA的交叉反应及与几种结构和功能类似物的交叉反应,然后采用间接竞争ELISA方法建立检测标准曲线.将制备的含克伦特罗单克隆抗体的小鼠腹水用盐析法和免疫亲和柱层析法进行抗体纯化.结果:经ELISA法测定,单克隆抗体亲和常数为2.90×1010 mol/L,抗体效价最高达106.单克隆抗体对BSA无反应,对几种结构和功能类似物的交叉反应率均小于0.005％.建立的标准曲线R2=0.9812,最低检测限为1.0 ng/ml.结论:建立了间接竞争ELISA检测CL的标准曲线.自制的克伦特罗单克隆抗体亲和力好,特异性高.为以后实际样品的检测及制备CL免疫检测试纸条和试剂盒奠定了基础.