2型单纯疱疹病毒毒力蛋白ICP34.5的真核表达及其对Vero细胞活性的影响

• 作者: 刘岩 杨慧兰 樊建勇 游韶平 钟菲菲 高睿迪
• 来源期刊: 生物技术通讯
• 学科: 生物学
• 关键词: 2型单纯疱疹病毒 感染细胞多肽34.5 非洲绿猴肾细胞 真核表达
• 年，卷（期）: 2014,（2）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 170-174
• 页数: 5页
• 分类号: Q78
• 字数: 4179字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-0002.2014.02.004

摘要

目的:在非洲绿猴肾细胞(Vero细胞)中表达2型单纯疱疹病毒(HSV-2)毒力蛋白感染细胞多肽34.5(ICP34.5),并检测其对Vero细胞活性的影响.方法:PCR扩增HSV-2的ICP34.5基因,连接至pEGFP-C2载体,并对重组真核表达载体pEGFP-ICP34.5进行双酶切测序验证;将重组子瞬时转染Vero细胞,RT-PCR检测其在mRNA水平的表达,荧光倒置显微镜观察融合蛋白的表达,MTT法检测细胞活性.结果:经双酶切和测序验证表明pEGFP-ICP34.5构建成功,转染细胞后经RT-PCR验证有目的基因的转录,荧光显微镜下观察到融合蛋白在转染的Vero细胞中表达,MTT法检测结果证实重组质粒可以抵消空质粒对细胞的损伤作用.结论:构建了pEGFP-ICP34.5真核表达载体,其能在Vero细胞中高效表达,并能抵消空质粒对细胞的损伤作用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	杨慧兰		224	938	14.0	20.0
2	刘岩		26	61	4.0	6.0
4	樊建勇		71	362	10.0	15.0
7	钟菲菲		4	4	1.0	2.0
11	游韶平		2	5	2.0	2.0
13	高睿迪	华南理工大学生物科学与工程学院	1	3	1.0	1.0