血清1型鸭甲型肝炎病毒实时定量P CR检测方法的建立与初步应用

• 作者: 孙庆歌 朱薇 李晶梅 祝春花 肖爱芳 薛霜 谢红玲 赖志 马慧慧 高俊锋
• 来源期刊: 中国兽药杂志
• 学科: 农学
• 关键词: 血清1型鸭甲型肝炎病毒 实时定量PCR TaqMan探针
• 年，卷（期）: 2014,（12）
• 所属期刊栏目: 微生物与免疫
• 页码范围: 17-21
• 页数: 5页
• 分类号: S858.32
• 字数: 3714字
• 语种: 中文

摘要

为建立一种可检测血清1型鸭甲型肝炎病毒（ DHAV－1）的实时定量PCR方法，根据GenBank中DHAV－15’非编码区的保守区，设计合成1对引物和1条TaqMan探针，以构建的重组质粒作为标准品，绘制标准曲线，并对所建立方法进行了特异性、敏感性和可重复性试验以及临床病料检测初步应用。结果，该方法与血清3型鸭甲型肝炎病毒、鸭瘟病毒、新城疫病毒、禽流感病毒、呼肠孤病毒、传染性支气管炎病毒等无交叉反应性；最低可以检测到10 copies／μL；组内和组间变异系数均小于3％；临床病料的检测结果与测序检测结果一致。结果表明，所建立的实时定量检测方法具有特异、敏感、稳定等优点，可用于DHAV－1的快速检测与定量分析。