大螟HSC70基因克隆及表达模式分析

• 作者: 孙猛 杜予州 汤小天 陆明星
• 来源期刊: 昆虫学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 大螟 HSC70 克隆 表达模式 荧光定量PCR
• 年，卷（期）: 2014,（7）
• 所属期刊栏目: 生理与生化
• 页码范围: 787-797
• 分类号: Q966
• 语种: 中文

摘要

[目的]近年来,大螟Sesamia inferens (Walker)对水稻的为害逐渐加重并成为水稻的重要害虫之一.随着全球气候变暖,大螟的分布区域也在逐渐向北延伸.HSP70家族作为分子伴侣参与生物生长发育并对外界刺激产生响应,对生物功能蛋白质的正确折叠及其转运有着重要意义.本研究旨在明确HSP70家族HSC70基因在大螟不同组织、不同发育阶段以及低温胁迫下的表达差异,初步探讨大螟对环境适应的分子机理.[方法]应用RT-PCR及RACE技术从大螟5龄幼虫中克隆得到HSC70基因;进行基因组验证,得到其基因组序列,分析内含子的位置及大小;应用实时定量PCR技术分析大螟HSC70基因的表达模式.[结果]大螟HSC70基因长2 160 bp,命名为Sihsc70(GenBank登录号:KJ639908),开放阅读框长1 962 bp,编码653个氨基酸,推测分子量为71.6 kDa.其氨基酸序列中含有3个HSP70家族保守序列,在C-末端存在细胞质定位信号,说明大螟HSC70是细胞质热激蛋白家族成员.大螟HSC70基因组序列长度为3 522 bp(GenBank登录号:KJ639909),含有2个内含子,长度分别为685 bp(位于编码区上游)和803 bp(位于编码区内).在大螟5龄幼虫的不同组织中Sihsc70表达量差异不显著(P＞0.05),其中在中肠、后肠和体壁中的表达量较高,在唾腺中的表达量最低;在大螟不同发育阶段中,Sihsc70的表达量在雌成虫最低,较高的3个阶段依次为卵、2龄幼虫和5龄幼虫,分别为雌成虫表达量的6.33,3.21和1.86倍;相对于对照组(27℃),低温胁迫对大螟5龄幼虫HSC70基因表达的影响差异不显著(P＞0.05).[结论]结果说明,大螟HSC70基因在不同发育阶段和幼虫不同组织中具有不同的表达水平,而低温胁迫不能诱导该基因大量表达.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	杜予州	扬州大学园艺与植物保护学院	136	1917	24.0	35.0
2	陆明星	扬州大学园艺与植物保护学院	14	127	6.0	11.0
3	孙猛	扬州大学园艺与植物保护学院	4	20	3.0	4.0
4	汤小天	扬州大学园艺与植物保护学院	3	10	2.0	3.0