淋巴瘤特异性高效基因表达载体survivin-VISA的构建与鉴定

• 作者: 李建璜 罗宁 肖志强
• 来源期刊: 肿瘤防治研究
• 学科: 医学
• 关键词: survivin启动子 VP16-GAL4-WPRE整合型系统性放大系统(VISA) 土拨鼠肝炎病毒转录后调控元件(WPRE) 二步转录放大系统(TSTA) 淋巴瘤
• 年，卷（期）: 2014,（7）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 724-727
• 分类号: R73-36
• 语种: 中文
• DOI: 10.3971/j.issn.1000-8578.2014.07.008

摘要

目的 构建含survivin启动子及VP 16-GAL4-WPRE整合型系统性放大系统(VISA)的淋巴瘤特异性高效基因表达载体survivin-VlSA(S-VISA).方法 应用基因重组技术构建含survivin启动子与土拨鼠肝炎病毒转录后调控元件(WPRE)、二步转录放大系统(TSTA)和VISA系统分别构成的表达载体S-WPRE、S-TSTA和S-VISA,经PCR法及酶切鉴定.用脂质体法转染淋巴瘤细胞株Ramos、U937、Raji及人肝细胞株Chang Liver,检测荧光素酶活性.结果 表达载体S-WPRE、S-TSTA和S-VISA通过PCR法及酶切鉴定证明构建正确,荧光素酶活性检测表明S-VISA载体在淋巴瘤细胞中实现了目的基因特异性高效表达.结论 成功构建了含survivin启动子及VISA系统的淋巴瘤特异性高效基因表达载体S-VISA,为淋巴瘤基因治疗的进一步研究奠定了良好的基础.