一株口蹄疫病毒非结构蛋白3A 单克隆抗体的表位肽段鉴定

• 作者: 付元芳 刘在新 卢曾军 孙普 曹轶梅 曾巧英 李平花 王娜
• 来源期刊: 动物医学进展
• 学科: 农学
• 关键词: 口蹄疫病毒 单克隆抗体 抗原表位
• 年，卷（期）: 2014,（10）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 7-9
• 页数: 3页
• 分类号: S852.659.6
• 字数: 2413字
• 语种: 中文

摘要

为鉴定口蹄疫病毒非结构蛋白3A 的单克隆抗体3A24＃识别的表位区，对非结构蛋白3A 分两个肽段进行原核表达，其中3A1和3A2肽段分别包含3A 蛋白的第1位～89位和77位～153位氨基酸。分别针对两肽段基因设计并合成引物，PCR 扩增后定向克隆到原核表达载体 pET-30a（＋）-PES-SUMO，将重组质粒转化宿主菌 E．coli BL21（DE3）pLys，IPTG 诱导表达。用单克隆抗体3A24＃对表达的3A1和3A2肽段进行 Western blot 检测，以鉴定单克隆抗体3A24＃的识别表位肽。SDS-PAGE 分析表明，成功表达了3A1和3A2肽段，大小分别为26 ku 和25 ku。Western blot 分析表明，FMDV 牛阳性血清与两肽段均能识别，而单克隆抗体3A24＃只能与3A2肽段发生反应，与3A1肽段不发生反应。3A24＃单克隆抗体识别的抗原表位位于3A2肽段，即3A 蛋白的第89aa～第153aa 肽段上。