隐孢子虫截短热休克蛋白70(HSP70)基因的原核表达及其抗原性分析

• 作者: 唐林生 彭昊 李军 杨威 潘艳 许力干 谢永平 陈泽祥 陶立
• 来源期刊: 畜牧与兽医
• 学科: 农学
• 关键词: 隐孢子虫 热休克蛋白70 表达 免疫原性
• 年，卷（期）: 2014,（12）
• 所属期刊栏目: 试验研究
• 页码范围: 5-9
• 页数: 5页
• 分类号: S852.72+3
• 字数: 4258字
• 语种: 中文

摘要

根据GenBank上的安氏隐孢子虫HSP70基因主要抗原片段区序列设计特异性引物,用RT-PCR方法扩增出目的片段,构建克隆载体,双酶切后连接到pET-32a表达载体,成功构建了表达质粒pET-32a-HSP70.将鉴定正确的重组质粒转化到表达菌中,IPTG诱导表达,表达产物经过SDS-PAGE和Western blot鉴定和分析,证实获得HSP70融合蛋白.以鼠抗安氏隐孢子虫卵囊高免血清为一抗进行Western blot检测,试验结果证实重组HSP70蛋白具有良好的免疫反应性,为建立隐孢子虫病免疫学诊断方法奠定了基础.