柑橘半胱氨酸蛋白酶基因CsCysP的分离、亚细胞定位及表达分析

• 作者: 张军 张凌云 朱世平 钟广炎 闫树堂 陈娇 马岩岩
• 来源期刊: 园艺学报
• 学科: 农学
• 关键词: 柑橘 半胱氨酸蛋白酶 逆境 基因表达
• 年，卷（期）: 2014,（4）
• 所属期刊栏目: 果树
• 页码范围: 621-630
• 分类号: S666
• 语种: 中文

摘要

以‘奥林达’夏橙[Citrus sinensis(L.) ‘Olinda’]为材料,采用RT-PCR结合RACE技术从果萼离层中分离到1个半胱氨酸蛋白酶类基因,命名为CsCysP(GenBank登录号:KJ093387).该基因的cDNA全长为1 485 bp,开放阅读框(ORF)为1 083 bp,推测可编码360个氨基酸残基的多肽.其基因组序列与cDNA比对后显示有3个内含子.分析发现,CsCysP属于papain-like(木瓜蛋白酶,C1A)家族的半胱氨酸蛋白酶,与拟南芥、大豆、烟草、杨树等的同源蛋白有73％～83％的相似性.亚细胞定位结果显示CsCysP蛋白定位在细胞壁上.qRT-PCR结果表明CsCysP在老叶、成熟果实果萼离层和花中的表达量明显高于幼苗的根、茎、叶.CsCysP的表达被脱落酸、高盐和PEG6000诱导,低温、乙烯、芸薹素内酯、水杨酸和甲基茉莉酸可抑制其表达.利用基因工程手段获得了柑橘过表达CsCysP的5个转基因株系.