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摘要:
为了制备针对ClassⅠ新城疫病毒Duck/JS/10弱毒株NP蛋白的单克隆抗体,采用RT-PCR方法从Class Ⅰ新城疫病毒Duck/JS/10弱毒株中扩增出NP基因,并定向克隆至pET-32a-c(+)原核表达载体中,经酶切鉴定及测序验证后转化BL21 (DE3)进行原核表达,用纯化得到的NP重组蛋白免疫6周龄BALB/c小鼠.结果显示,成功表达出分子质量约为71 ku的NP重组融合蛋白,SDS-PAGE结果显示,表达的蛋白以可溶性形式存在于菌体中.用间接ELISA方法成功筛选出2株针对Class Ⅰ新城疫病毒Duck/JS/10弱毒株NP蛋白的单克隆抗体,该抗体具有良好的ELISA、IFA以及Western-blot效价.免疫特异性鉴定结果表明,获得的2株单克隆抗体具有良好的通用性,无论是Class Ⅰ毒株还是两种不同基因组长度的ClassⅡ毒株,均能与其发生特异反应.
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文献信息
篇名 Class Ⅰ新城疫病毒Duck/JS/10弱毒株NP重组蛋白的表达及广谱性NDV单克隆抗体的制备
来源期刊 中国兽医科学 学科 农学
关键词 新城疫病毒 Class Ⅰ 单克隆抗体 NP蛋白
年,卷(期) 2014,(6) 所属期刊栏目
研究方向 页码范围 611-616
页数 6页 分类号 S852.659.5
字数 语种 中文
DOI
五维指标
作者信息
序号 姓名 单位 发文数 被引次数 H指数 G指数
1 丁铲 中国农业科学院上海兽医研究所 95 454 11.0 16.0
2 谭磊 中国农业科学院上海兽医研究所 21 70 5.0 7.0
3 仇旭升 中国农业科学院上海兽医研究所 36 114 7.0 8.0
4 孙英杰 中国农业科学院上海兽医研究所 28 113 6.0 9.0
5 宋翠萍 中国农业科学院上海兽医研究所 25 62 5.0 6.0
6 詹媛 中国农业科学院上海兽医研究所 16 27 3.0 4.0
7 曲昱蓉 中国农业科学院上海兽医研究所 7 5 1.0 2.0
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新城疫病毒
Class Ⅰ
单克隆抗体
NP蛋白
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中国兽医科学
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1673-4696
62-1192/S
大16开
甘肃省兰州市盐场堡徐家坪1号
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1971
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