埃博拉病毒NP抗原表位区段的克隆和表达

• 作者: 修冰水 冯晓燕 刘志强 张旭辉 张贺秋 朱翠侠 李鹏飞 段翠密 王晓丹 阙海萍
• 来源期刊: 军事医学
• 学科: 医学
• 关键词: 埃博拉病毒 核蛋白 抗原表位区段 表达
• 年，卷（期）: 2014,（9）
• 所属期刊栏目: 热点追踪
• 页码范围: 659-662
• 页数: 4页
• 分类号: R512.8
• 字数: 2708字
• 语种: 中文
• DOI: 10.7644/j.issn.1674-9960.2014.09.001

摘要

目的分析埃博拉病毒核蛋白（ NP）抗原表位，克隆表达埃博拉病毒NP抗原，为免疫学诊断试剂的研究奠定基础。方法采用BioSun生物学软件预测分析埃博拉病毒NP抗原的氨基酸表位区间，采用大肠杆菌优势密码子反向翻译成基因序列，采用PCR退火合成法合成NP优势密码子抗原基因，并利用载体pBVIL1进行克隆表达。采用间接ELISA技术评价获得NP抗原的特异性。结果确定埃博拉病毒NP抗原的氨基酸表位位于360～739 aa，共设计36条引物，扩增合成1140 bp的NP抗原基因，克隆表达后，融合蛋白相对分子质量为58×103，测序结果显示插入的NP基因正确。初步结果显示，NP抗原的特异性为99．24％（130／131）。结论获得埃博拉病毒NP抗原，为进一步研制特异的埃博拉病毒快速诊断试剂提供了抗原储备。