抗扎伊尔型埃博拉病毒单克隆抗体的制备和鉴定

• 作者: 刘荣娇 宾蕾 李子微 杜宗敏 王仁霞 王津 谭亚芳 邓仲良
• 来源期刊: 中国人兽共患病学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 埃博拉病毒 核蛋白 单克隆抗体 真核表达系统
• 年，卷（期）: 2018,（7）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 619-623
• 页数: 5页
• 分类号: Q786|Q93
• 字数: 4026字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-2694.2018.00.113

摘要

目的 采用扎伊尔型埃博拉病毒核蛋白(EBOV NP)的合成多肽为免疫原制备鼠源单克隆抗体,并用4种埃博拉流行株核蛋白基因的真核表达蛋白对制备的单克隆抗体进行特异性分析.方法 用人工合成的扎伊尔型埃博拉病毒核蛋白多肽免疫动物,进行细胞融合后筛选阳性杂交瘤细胞.构建埃博拉病毒4种亚型的真核表达载体转染HEK293T细胞以表达目的蛋白,再以真核表达蛋白为抗原,用免疫印迹方法分析扎伊尔型埃博拉病毒单克隆抗体的特异性.结果 完成了抗扎伊尔型单克隆抗体的制备,共得到能分泌抗扎伊尔型埃博拉病毒单克隆抗体的杂交瘤细胞12株,小鼠腹水抗体效价介于1:104～1:105,其中3株杂交瘤细胞株分泌的抗扎伊尔型埃博拉病毒单克隆抗体与其他3种亚型无交叉反应,抗体效价高、特异性好.结论 成功制备抗扎伊尔型埃博拉病毒单克隆抗体,为建立快速检测埃博拉病毒的方法奠定基础.