猪繁殖与呼吸综合征病毒非结构蛋白Nsp4和Nsp12多克隆抗体的制备与鉴定

• 作者: 刘星 姜平 王先炜 王海 田恬
• 来源期刊: 中国兽医科学
• 学科: 农学
• 关键词: 猪繁殖与呼吸综合征病毒 Nsp4 Nsp12 多克隆抗体
• 年，卷（期）: 2014,（6）
• 页码范围: 636-640
• 页数: 5页
• 分类号: S852.659.6
• 语种: 中文

摘要

为了制备猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)两种非结构蛋白Nsp4和Nsp12的多克隆抗体,将Nsp4基因和Nsp12基因分别克隆至pET-32a(+)和pGEX-6P-1,并转化至BL21(DE3),用IPTG诱导表达,经过Ni-NTA镍离子亲和层析和包涵体洗液纯化,获得纯化的重组蛋白,然后用它们分别免疫BALB/c小鼠制备抗血清.SDS-PAGE和Western-blot鉴定结果显示,Nsp4和Nsp12分别以可溶性蛋白和包涵体形式表达,大小分别为42 ku和44 ku,均具有良好的反应原性.Western-blot和IFA结果显示,制备的抗血清均与PRRSV发生特异性反应,ELISA抗体效价均可达1:32 000.本研究结果为PRRSV Nsp4和Nsp12的生物学功能研究奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	姜平		186	1921	25.0	35.0
2	王海		14	355	8.0	14.0
3	王先炜		58	439	11.0	19.0
4	刘星		3	0	0.0	0.0
5	田恬		1	0	0.0	0.0