脊索瘤中microRNA的差异性表达及其RNA编辑

• 作者: 吕国华 戴瑜亮 李磊 王冰 邝磊 陈宇乔
• 来源期刊: 中国脊柱脊髓杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 脊索瘤 microRNA RNA编辑 RNA腺苷脱氨酶
• 年，卷（期）: 2014,（11）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 1013-1019
• 页数: 7页
• 分类号: R739.4|R730.2
• 字数: 4749字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1004-406X.2014.11.10

摘要

目的:检测脊索瘤组织中microRNA (miRNA)的差异性表达情况,探讨其RNA编辑.方法:使用RT-qPCR(Real-time quantitative polymerase chain reaction)技术检测骶骨脊索瘤组织1 1种候选miRNA的表达水平,将其与髓核组织中的表达水平进行比较,对表达异常的miRNA前体(pri-miRNAs)的DNA和cDNA序列进行对比,检测是否存在RNA编辑.使用蛋白印迹法(Western blot)检测脊索瘤组织中RNA编辑的关键酶RNA腺苷脱氨酶(adenosine deaminase acting on RNA,ADARs)的表达.构建ADAR的表达载体,同时构建ERBB2和HOXA1的3'-非翻译区报告载体并转染miRNA模拟物和抑制物,将其和ADAR的表达载体共转染至人胚肾细胞293T(HEK293T细胞),用qRT-PCR检测miRNA的表达水平,并通过荧光素酶报告基因活性分析法对已测得异常表达的miRNA的靶基因ERBB2和HOXA1进行活性分析,检测ADAR与测得异常表达的miRNA的靶基因的关系.结果:与髓核组织相比,脊索瘤组织中miR-10a和miR-125a的相对表达程度明显下调(P＜0.05).脊索瘤组织中miR-10a和miR-125a的前体cDNA序列中出现了腺苷酸向鸟苷酸(A-G)突变,而在髓核组织中miR-10a和miR-125a前体的cDNA序列中无此改变,miR-10a和miR-125a在成熟过程中出现了A-IRNA编辑.4组脊索瘤组织中有3组存在ADAR1过度表达,2组存在ADAR2过度表达.转染了miRNA抑制物的HEK293T细胞中ADAR1表达出现上调,而miR-10a和miR-125a的表达出现下调,miR-10a的靶基因ERBB2和miR-125a的靶基因HOXA1的荧光素酶活性显著增高;相反,转染了miRNA模拟物的HEK293T细胞中ADAR1表达出现下调,而miR-10a和miR-125a的表达出现上调,ERBB2和HOXA1的荧光素酶活性显著降低.结论:ADAR1的过度表达可能通过介导A-I RNA编辑影响miR-10a和miR-125a的成熟和表达,参与脊索瘤发生中的细胞异常增殖调控.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李磊	中南大学湘雅二医院脊柱外科	45	217	8.0	12.0
2	吕国华	中南大学湘雅二医院脊柱外科	214	1432	19.0	24.0
3	王冰	中南大学湘雅二医院脊柱外科	166	1675	18.0	34.0
4	邝磊	中南大学湘雅二医院脊柱外科	11	46	4.0	6.0
5	戴瑜亮	中南大学湘雅二医院脊柱外科	13	26	3.0	4.0
6	陈宇乔	中南大学湘雅二医院脊柱外科	2	6	1.0	2.0