NogoB-shRNA表达质粒的构建及其在大鼠原代肝星状细胞收缩中的作用

• 作者: 但雪莲 吴文超 文茂瑶 杨丽 门若庭
• 来源期刊: 四川大学学报（医学版）
• 关键词: 短发夹RNA NogoB 肝星状细胞
• 年，卷（期）: 2014,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 362-366
• 语种: 中文

摘要

目的 构建针对大鼠NogoB基因的shRNA表达质粒,并初步探究其在大鼠肝星状细胞(HSCs)收缩功能中的作用.方法 设计并合成针对大鼠NogoB基因3个不同位点的shRNA,通过DNA重组技术,将shRNA插入pSuper质粒中,构建NogoB-shRNA重组质粒,转染至大鼠原代肝星状细胞(HSCs)中,并通过Realtime PCR技术检测基因的相对表达量,筛选出能沉默大鼠NogoB基因的重组质粒,再通过Western blot加以验证,同时观察NogoB基因被抑制后,HSCs中内皮素1(Endothelin-1,ET-1)受体A、受体B(ETA、ETB)表达水平的变化.结果 构建的3对重组质粒中,NogoB-shRNA2对NogoB的基因的表达具有明显的抑制作用.NogoB基因被抑制后,大鼠HSCs中ETA的表达无明显变化,ETB的表达升高,ETA/ETB的水平降低.结论 成功构建了有效、特异的抑制大鼠NogoB基因表达的shRNA表达质粒,并初步观察到NogoB在肝星状细胞的收缩中可能有一定作用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	杨丽	四川大学华西医院消化内科	90	364	10.0	15.0
2	吴文超	四川大学华西医院再生医学研究中心心血管疾病研究室	26	102	5.0	9.0
3	文茂瑶	四川大学华西医院消化内科	11	78	5.0	8.0
4	门若庭	四川大学华西医院消化内科	7	25	3.0	4.0
5	但雪莲	四川大学华西医院消化内科	2	1	1.0	1.0