麻痹性贝类毒素受体蛋白Saxiphilin的克隆与表达

• 作者: 丁晶 刘慧玲 吕敬章 岳振峰 张恒 曹玲 杨凯 汤慕瑾 葛丽雅
• 来源期刊: 食品安全质量检测学报
• 关键词: 麻痹性贝类毒素受体蛋白 杆状病毒表达载体系统 镍柱亲和纯化
• 年，卷（期）: 2014,（6）
• 所属期刊栏目: 食品分析与检测
• 页码范围: 1739-1745
• 页数: 7页
• 字数: 4204字
• 语种: 中文

摘要

目的：麻痹性贝类毒素受体蛋白 Saxiphilin可特异性结合麻痹性贝类毒素,本文采用杆状病毒表达载体系统对Saxiphilin进行体外表达研究。方法从牛蛙肝脏克隆得到saxiphilin基因(N端含有自身分泌信号肽),利用特异引物使其C端带上组氨酸标签。结果使用杆状病毒表达载体系统构建带有目的基因的重组病毒,用病毒感染草地贪夜蛾(Spodoptera frugiperda)细胞 Sf9以表达 Saxiphilin,通过优化细胞培养基中胎牛血清含量及感染时间,确定使用无血清培养基培养,重组病毒感染Sf9细胞72 h时,培养基中可溶性目的蛋白表达量最大。结论通过镍柱纯化得到Saxiphilin蛋白,以期将此蛋白进一步用于麻痹性贝类毒素的检测。