不同亚类小鼠IgG对SpA和SpG单结构域构成的随机组合噬菌体文库的体外进化研究

• 作者: 丁莹莹 冯娇娇 吴莉莉 张婧 徐文竹 潘卫 王锦红 邓松华
• 来源期刊: 安徽医科大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: 噬菌体文库 定向进化 亚类 新型免疫球蛋白结合分子
• 年，卷（期）: 2014,（9）
• 所属期刊栏目: 基础医学研究
• 页码范围: 1227-1232,1233
• 页数: 7页
• 分类号: R392.7
• 字数: 4962字
• 语种: 中文

摘要

目的判断不同亚类小鼠IgG Fc段构像及与SpA或SpG的结合特点,采用不同亚类小鼠IgG对SpA和SpG单结构域构成的随机组合噬菌体展示文库进行亲和筛选。方法不同亚类小鼠IgG对噬菌体文库进行亲和筛选,获得具有结合优势的单结构域排列组合,噬菌体ELISA法来比较其与不同亚类小鼠IgG的结合特性,优势组合分子经原核表达蛋白,HRP标记后,ELISA法进一步来比较其与小鼠不同亚类IgG的结合特性。结果小鼠IgG1、IgG2a、IgG2b和IgG3分别经过5、4、5和5轮亲和筛选后,其文库的展示片段大小均为2个domain,表明进化完全。测序分析显示：小鼠 IgG1、IgG2a、IgG2b和IgG3筛选得到的具有结合优势组合分子分别是D-D、D-D、A-C和D-C。噬菌体 ELISA验证结合优势组合分子对小鼠不同亚类IgG的结合能力；蛋白经HRP标记后的ELISA结果和筛选不完全一致,但其结合强弱具有一致性,均为：IgG3>IgG2a>IgG2b>IgG1。结论得到3种不存在于天然SpA、SpG分子中,分别与不同亚类小鼠IgG具有较强结合作用的新型组合分子D-D、A-C和D-C,为进一步研究IgG Fc段构像及与SpA或SpG的结合特点提供了新的参考分子。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	潘卫	第二军医大学病原生物学教研室	64	255	8.0	12.0
2	邓松华	安徽医科大学病理生理学教研室	34	128	6.0	9.0
3	王锦红	第二军医大学病原生物学教研室	7	7	2.0	2.0
4	张婧	安徽医科大学病理生理学教研室	10	32	3.0	5.0
5	丁莹莹	第二军医大学病原生物学教研室	3	4	1.0	1.0
6	冯娇娇	第二军医大学病原生物学教研室	5	11	2.0	3.0
7	吴莉莉	安徽医科大学病理生理学教研室	3	4	2.0	2.0
8	徐文竹	安徽医科大学病理生理学教研室	2	9	2.0	2.0