噬菌体展示IgA亲和体随机组合文库的构建

• 作者: 周波 周霞 张玉侠 温宗梅 潘卫 潘欣 蒋少华 贾建安 邓松华 陈秋莉
• 来源期刊: 安徽医科大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: 细菌噬菌体/遗传学
• 年，卷（期）: 2006,（4）
• 所属期刊栏目: 基础医学研究
• 页码范围: 361-364
• 页数: 4页
• 分类号: R373.9|R394
• 字数: 3100字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-1492.2006.04.001

摘要

目的 构建噬菌体展示IgA亲和体随机组合文库,研究IgA结合分子结构与功能的关系.方法 基因合成IgA亲和体ZA1、ZA2片段.片段两端引入Kpn I酶切位点,3'端引入随机连接肽序列,Kpn I酶切,随机连接,克隆于噬菌粒展示载体pCANTAB5S的Kpn I克隆位点上,转化大肠杆菌TGI,辅助噬菌体M13K07拯救,构建噬菌体展示随机组合文库.结果 基因合成IgA亲和体;构建噬菌体展示IgA亲和体随机组合文库,容量为3.4×107,滴度为1.6×1012 TU/L;文库中含79%以上的阳性克隆;序列分析显示组合文库由ZA1、ZA2随机组合而成,连接方式符合随机连接的特点,各亲和体之间连接肽序列也呈随机分布.结论 合成IgA亲和体,构建噬菌体展示IgA亲和体随机组合文库,该文库库容量、多样性和随机性可满足体外分子进化研究的要求.