微小隐孢子虫T7噬菌体展示文库的构建

• 作者: 姚龙泉 尹继刚 张西臣 李建华
• 来源期刊: 中国人兽共患病学报
• 学科: 医学
• 关键词: 微小隐孢子虫 T7噬菌体展示文库
• 年，卷（期）: 2006,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 26-28,42
• 页数: 4页
• 分类号: R382
• 字数: 3270字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-2694.2006.01.006

摘要

目的为筛选微小隐孢子虫保护性抗原基因,构建了微小隐孢子虫T7噬菌体展示文库.方法用Trizol 试剂提取微小隐孢子虫总RNA,分离纯化mRNA,经反转录合成双链cDNA.在双链cDNA末端加上定向EcoRⅠ/Hind Ⅲ接头,用EcoRⅠ和Hind Ⅲ消化接头,使形成两端分别带有EcoRⅠ和Hind Ⅲ粘性末端的双链cDNA.经Mini Column纯化,收集400 bp 以上的双链cDNA 片段,将其连接于带有EcoRⅠ和HindⅢ末端的T7Select 10-3b 载体,经体外包装后,以BLT5403为受体菌构建T7噬菌体展示文库.结果经测定,库容量为1.2×107 pfu/mL,重组率为96.7%,扩增后文库滴度为2.4×1010pfu/mL.对随机挑取的100 个噬菌斑进行PCR 鉴定,92%的插入片段大于400bp.结论成功构建了微小隐孢子虫T7噬菌体展示文库.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张西臣	吉林大学畜牧兽医学院	211	623	11.0	18.0
2	李建华	吉林大学畜牧兽医学院	302	1731	21.0	33.0
3	尹继刚	吉林大学畜牧兽医学院	51	322	9.0	16.0
4	姚龙泉	吉林大学畜牧兽医学院	15	31	3.0	5.0