当归DXR基因保守区克隆和组织特异性表达分析

• 作者: 夏琦 张金林 温随超 王引权 雒军
• 来源期刊: 中草药
• 学科: 医学
• 关键词: 当归 1-脱氧-D-木酮糖-5-磷酸还原异构酶 克隆 肌动蛋白 RT-PCR
• 年，卷（期）: 2014,（13）
• 所属期刊栏目: 药材与资源
• 页码范围: 1907-1913
• 分类号: R282.12
• 语种: 中文
• DOI: 10.7501/j.issn.0253-2670.2014.13.019

摘要

目的 克隆当归Angelica sinensis1-脱氧-D-木酮糖-5-磷酸还原异构酶(DXR)编码基因部分保守区序列,分析DXR基因在当归根、茎、叶中的特异性表达.方法 根据己克隆的植物DXR保守序列设计一对简并引物,以当归叶片总RNA为模板,采用RT-PCR方法扩增出DXR片段并连接到pGEM-T Easy载体上,转化大肠杆菌菌株Escherichia coli DH5α,阳性克隆经PCR检测后测序.运用RT-qPCR方法,以当归肌动蛋白基因Actin为内参基因,检测DXR在当归不同组织中的表达量.结果 得到一段564 bp的DXR基因序列,并在GenBank注册(登录号:KJ000259).序列分析表明,该片段编码187个氨基酸,与GenBank中注册的海岛棉Gossypium barbadense等6个物种的DXR核苷酸序列同源性和氨基酸序列同源性均在80％以上;DXR在叶中表达量最高,相对表达量分别是茎和根组织中的2.5倍和3.2倍(P＜0.01).结论 本研究首次从当归中克隆出了DXR部分保守区序列,并揭示了DXR在不同组织中的差异表达,为有效利用该基因奠定前期工作基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张金林	兰州大学草地农业科技学院	48	689	13.0	25.0
2	夏琦		17	89	6.0	9.0
3	温随超		6	44	5.0	6.0