猪流行性腹泻病毒N蛋白单克隆抗体的制备与鉴定

• 作者: 姜平 时晓丽 李玉峰 白娟 谈晨 赵攀登
• 来源期刊: 畜牧与兽医
• 学科: 农学
• 关键词: 猪流行性腹泻病毒 N蛋白 单克隆抗体
• 年，卷（期）: 2014,（5）
• 所属期刊栏目: 试验研究
• 页码范围: 1-5
• 页数: 5页
• 分类号: S855.3
• 字数: 3587字
• 语种: 中文

摘要

采用RT-PCR扩增猪流行性腹泻病毒(PEDV)N蛋白基因并克隆至原核表达载体pET-28a,转化到宿主表达菌BL21后经IPTG诱导表达和Ni柱纯化,SDS-PAGE和Western Blot鉴定重组N蛋白,其大小约为58 ku.将纯化重组N蛋白免疫BALB/c小鼠,通过杂交瘤细胞融合,PEDV间接ELISA方法筛选,制备获得4株能稳定分泌PEDV抗体的杂交瘤细胞株1C9、4C8、4F8和6A11.Western blot和间接免疫荧光试验证明其与PEDV均有特异性反应,单抗亚类鉴定均属于IgG1,轻链为κ型.杂交瘤细胞培养上清ELISA抗体效价为1:1600～6400,腹水ELISA抗体效价达1:1.024x105以上;4株细胞连续培养20代,其ELISA抗体效价基本一致.本研究为PEDV感染的诊断和致病机制研究提供了有用工具.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李玉峰	南京农业大学农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室	105	845	16.0	23.0
2	姜平	南京农业大学农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室	186	1921	25.0	35.0
3	时晓丽	南京农业大学农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室	10	28	3.0	5.0
4	谈晨	南京农业大学农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室	3	8	2.0	2.0
5	赵攀登	南京农业大学农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室	2	6	1.0	2.0
6	白娟	南京农业大学农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室	37	73	5.0	7.0