Perilipin5基因功能结构域载体的构建及亚细胞定位分析

• 作者: 刘芳 卢晓朝 李航 李青 潘树义 赵振广
• 来源期刊: 现代生物医学进展
• 学科: 生物学
• 关键词: perilipin5 功能结构域 脂滴 亚细胞定位
• 年，卷（期）: 2014,（5）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 805-810
• 分类号: Q75|Q78
• 语种: 中文
• DOI: 10.13241/j.cnki.pmb.2014.05.002

摘要

目的:依据perilipin5的功能结构域,构建含perilipin5截断体的真核表达载体,并研究它们的亚细胞定位.方法:以小鼠肝脏cDNA文库为模板,PCR扩增出perilipin5的全长及功能结构域,将之分别装载入真核表达载体PCMV5中,并引入HA标签.酶切和测序鉴定,脂质体法将构建的质粒转染293T细胞,Western blot验证表达,免疫荧光检测标记HA,于荧光显微镜下观察perilipin5各结构域的亚细胞定位.结果:构建的质粒序列正确,转染细胞后可检测到HA-perilipin5融合蛋白的表达,免疫荧光显示含有1-188aa结构域的perilipin5截断体可定位于脂滴表面,1-188aa一旦缺失perilipin5的截断体则弥散于胞内.结论:包含perilipin5功能结构域的真核表达载体构建成功,perilipin5的1-188aa与其脂滴定位密切相关.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李青	第四军医大学病理与病理生理学教研室	138	696	13.0	20.0
2	潘树义	海军总医院高压氧科全军高压氧中心	76	299	10.0	12.0
3	李航	海军总医院高压氧科全军高压氧中心	12	45	4.0	6.0
4	刘芳	第四军医大学病理与病理生理学教研室	45	258	9.0	13.0
5	赵振广	海军总医院高压氧科全军高压氧中心	2	3	1.0	1.0
6	卢晓朝	第四军医大学生化教研室	1	0	0.0	0.0