沙丁胺醇对果蝇的化蛹、羽化、寿命及抗氧化能力和DNA损伤的影响

• 作者: 孙冰 张春红 林欣大
• 来源期刊: 中国农业科学
• 关键词: 沙丁胺醇 果蝇 氧化损伤 单细胞凝胶电泳 DNA损伤
• 年，卷（期）: 2014,（19）
• 所属期刊栏目: 畜牧?兽医?资源昆虫
• 页码范围: 3890-3897
• 页数: 8页
• 语种: 中文
• DOI: 10.3864/j.issn.0578-1752.2014.19.018

摘要

【目的】利用重要的模式生物果蝇研究沙丁胺醇的作用机制，探索瘦肉精对生物体产生的影响及其分子机制，为进一步在生产中开发出更快速、精准且高效的瘦肉精检测方法提供重要的基础。【方法】将果蝇一龄幼虫放到不同浓度的沙丁胺醇培养基上饲喂，每天记录果蝇化蛹和羽化的情况，并统计出果蝇的化蛹率和羽化率及化蛹时间和羽化时间。收集24 h内羽化的果蝇，放入不同浓度沙丁胺醇培养基和基础培养基中，每管放入雌雄果蝇各25只，每个浓度设置4个平行实验。每天记录果蝇的存活数，每3 d更换一次培养基，直至果蝇全部死亡。分别统计雌雄果蝇半数死亡天数，平均寿命和平均最高寿命。收集不同浓度沙丁胺醇培养基上的3日龄成虫，雌雄果蝇各取15只放入离心管，研磨制成组织匀浆，离心（2500 r/min，10 min）后取上清，然后按照试剂盒的方法测定SOD和CAT活力，同时检测MDA的含量；以果蝇3日龄成虫的中肠细胞为研究对象，采用单细胞凝胶电泳技术（Single cell gel electrophoresis, SCGE）对细胞进行处理，经EB染色后，在荧光显微镜下观察果蝇细胞DNA损伤情况并拍照，结合CometscoreTM软件对图像进行分析。【结果】在沙丁胺醇的作用下，果蝇化蛹率和羽化率随处理浓度增加而降低，但是经统计分析发现差异不显著（P＞0.05），对果蝇化蛹时间和羽化时间也没有显著影响（P＞0.05）；用沙丁胺醇饲喂果蝇之后，对3日龄成虫体内SOD、CAT活力和MDA含量进行测定表明，随处理浓度的增加使体内MDA含量显著增加（P＜0.05），CAT的活力被抑制，呈现出显著降低的趋势（P＜0.05），促使体内抗氧化系统产生作用SOD活力显著提高（P＜0.05）；正是由于机体内抗氧化系统的保护机制产生作用，使得在一定浓度下处理的果蝇寿命呈现增加的趋势。对果蝇DNA损伤检测的试验表明，经沙丁胺醇处理之后，果蝇细胞就出现损伤，在SCGE的检测下可以观察到DNA损伤形成的拖尾，并且随着浓度的增加损伤情况也越严重，但是彗星图片中没有出现细胞核首尾分离的情况，可知沙丁胺醇并没有引起细胞凋亡。经统计分析，各处理浓度组的“彗星”尾长（Tail length, TL）、尾距（Olive tail moment, OTM）和尾部DNA百分含量（%DNA in tail），与对照组相比，均有显著差异（P＜0.05）。【结论】沙丁胺醇对果蝇化蛹和羽化没有显著影响；对果蝇抗氧化系统产生作用，抑制CAT活力，使SOD活力显著增加，使得在较高浓度处理时出现显著延长果蝇的寿命的情况；经沙丁胺醇处理之后，就会引起果蝇DNA损伤并且与对照组存在显著差异，但是并没有出现细胞凋亡的情况。