腺病毒、呼吸道合胞病毒和博卡病毒三重荧光RT-PCR快速检测的研究分析

• 作者: 张然 彭博 房师松 武伟华 王昕
• 来源期刊: 热带医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 腺病毒 呼吸道合胞病毒 博卡病毒 三重荧光RT-PCR
• 年，卷（期）: 2014,（12）
• 所属期刊栏目: 实验研究论著
• 页码范围: 1560-1563
• 分类号: R373.1
• 语种: 中文

摘要

目的 利用荧光定量RT-PCR技术建立一种快速检测腺病毒、合胞病毒和博卡病毒的方法.方法 从GenBank随机下载腺病毒、合胞病毒和博卡病毒的目的基因,通过MEGA分析,利用Primer Express3.0软件设计三对引物及其相应的Taqman探针,利用一步法RT-PCR来建立和优化反应体系.10倍稀释阳性对照,来检验建立体系的灵敏度和重复性.利用具有相似临床症状的呼吸道病毒检验建立体系的特异性.结果 建立了一个单管对腺病毒、呼吸道合胞病毒和博卡病毒进行检测的三重荧光RT-PCR反应体系.该体系的检测灵敏度为102 copies/μl,扩增效率分别为92.24％、96.95％和99.70％,标准曲线的相关系数大于99％,重复性变异系数＜3.5％,特异性实验未发现有非特异性扩增.结论 建立的三重荧光可以快速、准确地检测腺病毒、合胞病毒和博卡病毒.