木霉双价基因表达载体的构建

• 作者: 李红梅 李纪顺 杨合同 陈凯 魏艳丽
• 来源期刊: 中国农学通报
• 学科: 生物学
• 关键词: 木霉 双价基因表达载体 几丁质酶基因 β-1,4-萄聚糖酶基因 潮霉素B抗性
• 年，卷（期）: 2014,（9）
• 所属期刊栏目: 生物技术—研究报告
• 页码范围: 232-236
• 分类号: Q782
• 语种: 中文

摘要

利用几丁质酶基因和β-1,4-葡聚糖酶基因构建双价基因表达载体,为木霉转化奠定基础.利用限制性内切酶酶切得到目的基因片段,通过T4 DNA ligase将基因插入表达框中,并采用PCR、酶切和核苷酸序列分析验证双价基因表达载体的正确性.利用启动子CaMV35S和终止子PolyA构建几丁质酶基因chi42的表达框,获得表达载体pC1302-C42;利用启动子CaMV35S和终止子Nos构建β-1,4-葡聚糖酶基因glu14的表达框,获得表达载体pC1300-2-G14;在单基因表达载体的基础上,通过串联构建双价基因表达载体pC1300-2-G14-C42,该表达载体含有潮霉素B抗性基因.经检测证实表达元件35S-chi42-PolyA和35S-glu14-Nos连接成功.得到的双价基因表达载体pC1300-2-G14-C42可直接用于木霉等丝状真菌的遗传转化,为构建木霉广谱高效工程菌株奠定基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李红梅	山东省科学院生物技术研究中心山东省应用微生物重点实验室	28	151	8.0	11.0
2	李纪顺	山东省科学院生物技术研究中心山东省应用微生物重点实验室	78	575	14.0	21.0
3	杨合同	山东省科学院生物技术研究中心山东省应用微生物重点实验室	115	1327	21.0	31.0
4	陈凯	山东省科学院生物技术研究中心山东省应用微生物重点实验室	30	366	11.0	18.0
5	魏艳丽	山东省科学院生物技术研究中心山东省应用微生物重点实验室	37	237	9.0	14.0