肠出血型大肠埃希菌O157：H7 Tir基因的原核表达

• 作者: 余芳 吴娴波 王芮宁 王金辉 范宏英 龙北国
• 来源期刊: 实用医学杂志
• 关键词: 出血型大肠埃希菌O157:H7 Tir-C 表达 活性鉴定
• 年，卷（期）: 2014,（10）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 1519-1522
• 页数: 4页
• 字数: 3934字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1006-5725.2014.10.002

摘要

目的：高效表达出血型大肠埃希菌O157：H7转位紧密黏附素受体Tir （translocation inti min receptor）的C末端蛋白，并初步鉴定其活性。方法：对EHEC O157：H7标准株EDL933 Tir完整的编码区基因序列和氨基酸序列进行生物信息学分析，选取C末端基因（命名为Tir-C），构建原核表达质粒PET-30a（＋）-Tir-C，转至E．coli BL21/DE3中，IPTG诱导表达，SDS-PAGE检测相对分子质量，Western blot鉴定免疫原性。结果：PCR扩增出675 bp的目的片段，构建的质粒经酶切鉴定及测序与预期一致。目的蛋白在裂解上清中有表达，纯化浓度达500μg/ mL，并有较好的免疫原性。结论：成功表达了有抗原活性的重组Tir-C蛋白，为研究0157：H7疫苗奠定了基础。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	范宏英	南方医科大学公共卫生与热带医学学院	22	108	7.0	8.0
2	吴娴波	南方医科大学公共卫生与热带医学学院	43	289	10.0	15.0
3	龙北国	南方医科大学公共卫生与热带医学学院	40	154	7.0	9.0
4	余芳	南方医科大学公共卫生与热带医学学院	3	54	2.0	3.0
5	王金辉		2	3	1.0	1.0
6	王芮宁	南方医科大学生物技术学院	1	2	1.0	1.0