趋化因子受体CXCR5慢病毒载体构建及人Burkitt's淋巴瘤Raji细胞的感染

• 作者: 李涯松 袁武锋
• 来源期刊: 中国卫生检验杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 趋化因子受体CXCR5 慢病毒包装 Raji细胞 自身免疫性疾病
• 年，卷（期）: 2014,（24）
• 所属期刊栏目: 分子诊断与基因检测
• 页码范围: 3575-3577,3580
• 页数: 4页
• 分类号: R733.4
• 语种: 中文

摘要

目的 构建可在人Burkitt's淋巴瘤Raji细胞中高效表达人CXCR5基因的慢病毒载体,用于CXCR5在自身免疫性疾病发病机制中的研究.方法 取健康人外周血分离单个核细胞并提取总RNA逆转录为cDNA,扩增CXCR5的CDS序列,进行克隆,最终构建CXCR5基因的慢病毒穿梭质粒pLVX-IRES-ZsGreen1-CXCR5.磷酸钙共转染法包装慢病毒,感染人Burkitt's淋巴瘤Raji细胞.空白质粒感染Raji细胞作为对照.免疫印迹分析空白质粒和过表达质粒Raji细胞中CXCR5基因表达.结果 测序显示CXCR5正确无误的插入到慢病毒穿梭载体pLVX-IRES-ZsGreen1多克隆位点中,且包装的慢病毒滴度达3×108 TU/ml,免疫印迹证实CXCR5基因在人Burkitt's淋巴瘤Raji细胞中正确表达.结论 成功构建可在人Burkitt's淋巴瘤Raji细胞中高效表达CXCR5基因的慢病毒穿梭载体,为研究CXCR5在自身免疫性疾病中的机制奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李涯松		20	52	5.0	6.0
2	袁武锋		12	30	4.0	4.0