趋化因子融合蛋白SDF-KDEL慢病毒载体pLenti6/V5-S-K的构建和表达

• 作者: 姜泓 孙利 孙永涛 庄严 张久聪 张野 张颖 曲晓莉 白雪帆 翟嵩 聂青和 连建奇 魏欣 黄长形
• 来源期刊: 中国感染控制杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 人免疫缺陷病毒 Ⅰ型 趋化因子受体 细胞内趋化因子 慢病毒载体 基因治疗 SDF-KDEL pLen-ti6/V5-S-K
• 年，卷（期）: 2008,（6）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 367-371
• 页数: 5页
• 分类号: R512.91
• 字数: 3959字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-9638.2008.06.002

摘要

目的 构建含趋化因子融合蛋白SDF-KDEL的慢病毒载体pLenti6/V5-S-K,为研究Ⅰ型人免疫缺陷病毒(HIV-1)感染的基因治疗奠定基础.方法 应用聚合酶链反应(PCR)技术扩增目的 基因片段SDF-KDEL,纯化后的PCR产物定向连接入pLenti6/V5-D-TOPO 载体,构建慢病毒载体pLenti6/V5-S-K,并在293FT细胞中建立慢病毒株,最后转染人宫颈癌HeLa细胞观察SDF-1蛋白的表达.结果 成功构建了慢病毒载体pLenti6/V5-S-K,并证实SDF-1蛋白可在HeLa细胞系内表达.结论 慢病毒载体可介导CXC-细胞内趋化因子(CXC-in-trakine,SDF-K)基因高效、稳定转染HeLa细胞,可用于抗HIV-1感染的基因治疗.