人真核表达慢病毒质粒载体plenti6/V5-D-TOPO(R)-T13RⅡ Dnglytk的构建及意义

• 作者: 刘妍 张婷 张志宏 徐勇 杨阔 畅继武
• 来源期刊: 天津医药
• 关键词: 转化生长因子β 慢病毒属 T淋巴细胞 聚合酶链反应 质粒
• 年，卷（期）: 2009,（7）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 565-567,后插2
• 页数: 4页
• 分类号: R3
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.0253-9896.2009.07.013

摘要

目的:构建含有T13R Ⅱ DNglytk的慢病毒质粒载体plenti6/V5-D-TOPO(R)-TβR Ⅱ DNglytk,用含有TβR ⅡDNglytk质粒的慢病毒感染T淋巴细胞使其对转化生长因子-β(TGF-β)失敏感.恢复其对肿瘤的杀伤活性.方法:以原始质粒为模板,PCR扩增TβRⅡ DN和HSV-tk基因,运用重组PCR方法将2个基因连接起来,获得TβR Ⅱ DNglytk融合基因,再以此基因为模板,PCR扩增获得其对照基因TRANSglytk.应用Invitrogen公司提供的系统,通过TOPO技术将2个融合基因分别连接到慢病毒表达质粒,并经过测序验证.结果:完成慢病毒表达质粒载体TβR Ⅱ DNglytk的构建,经测序验证序列正确,可以用于相应慢病毒的生产.结论:运用重组PCR技术和TOPO技术成功构建了plenti6/V5-D-TOPO(R)-T13RⅡDNglytI[载体,为产生对TGF-β不敏感的人肿瘤特异性淋巴细胞,并用于肿瘤的免疫治疗提供了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	畅继武		55	160	7.0	9.0
2	张志宏	天津医科大学第二医院泌尿外科	44	198	9.0	11.0
3	徐勇		37	147	7.0	9.0
4	杨阔		14	57	4.0	7.0
5	刘妍		15	60	4.0	7.0
6	张婷		2	1	1.0	1.0