大鲵柱状黄杆菌SYBR Green Ⅰ荧光定量PCR诊断试剂盒的研制

• 作者: 余波 周思旋 徐景峨 杨莉 罗永成 马永兵
• 来源期刊: 广东农业科学
• 学科: 农学
• 关键词: 大鲵 柱状黄杆菌 荧光定量PCR 16S rRNA基因
• 年，卷（期）: 2014,（21）
• 所属期刊栏目: 生物技术
• 页码范围: 144-148
• 页数: 5页
• 分类号: S947.3|Q93-33
• 字数: 3990字
• 语种: 中文

摘要

根据GenBank中柱状黄杆菌16S rRNA序列,设计1对特异性引物,PCR扩增获得16S rRNA基因片段,并克隆到pMD-18T载体上作为阳性标准品.通过对SYBR Green Ⅰ荧光定量PCR反应条件的优化,建立了黄杆菌的SYBR Green Ⅰ荧光定量PCR诊断方法,以此为基础研制试剂盒.试剂盒扩增产物的熔解曲线分析只出现1个单特异峰,无引物二聚体,对嗜水气单胞菌、荧光假单胞菌、迟缓爱德华、弗氏柠檬酸杆菌均无阳性信号扩增,重复性好,灵敏度可达12拷贝/μL.结果表明,研制的柱状黄杆菌SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR试剂盒具有特异、灵敏、快速、重复性好等特征,适合于大鲵临床样品的检测.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	余波		70	290	8.0	14.0
2	周思旋		43	112	6.0	8.0
3	杨莉		74	216	7.0	11.0
4	徐景峨		80	213	6.0	11.0
5	罗永成		11	55	5.0	6.0
6	马永兵		2	2	1.0	1.0