猪伪狂犬病毒野毒株 SYBR Green Ⅰ实时荧光定量 PCR 诊断试剂盒的研制

• 作者: 余波 史开志 周思旋 徐景峨 杨莉 谭诗文
• 来源期刊: 河南农业科学
• 学科: 农学
• 关键词: 猪伪狂犬病毒 野毒株 gE基因 荧光定量PCR 诊断试剂盒
• 年，卷（期）: 2014,（6）
• 页码范围: 128-131,144
• 页数: 5页
• 分类号: S854.4+3
• 字数: 3582字
• 语种: 中文

摘要

根据GenBank中猪伪狂犬病毒（PRV ）gE基因序列设计特异性的引物，PCR扩增获得PRV gE基因片段，构建重组质粒pMD18 T gE ，作为阳性标准品。对SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR反应条件进行优化，建立猪PRV SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR诊断方法，研制诊断试剂盒。扩增产物的熔解曲线分析结果显示只出现单特异峰，无引物二聚体，对猪圆环病毒（PC V 2）、猪细小病毒（PPV ）、PRV （gE基因缺失株）、猪源 E ．coli、猪瘟病毒（CSFV ）、猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒（PRRSV ）均无阳性信号扩增，且重复性好，灵敏度可达2．3×101拷贝/μL。结果表明，研制的PRV野毒株SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR试剂盒特异、灵敏、快速、重复性好，适于伪狂犬病毒临床样品的检测。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	谭诗文		48	205	7.0	12.0
2	余波		70	290	8.0	14.0
3	周思旋		43	112	6.0	8.0
4	杨莉		74	216	7.0	11.0
5	徐景峨		80	213	6.0	11.0
6	史开志		54	181	7.0	9.0