幽门螺旋杆菌尿素酶多表位疫苗CTB-UE的生物信息学分析及其表达

• 作者: 刘昆梅 奚涛 秦玉红 郭乐
• 来源期刊: 中国生物制品学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 幽门螺旋杆菌 尿素酶 融合蛋白 多表位疫苗 生物信息学 表达 纯化
• 年，卷（期）: 2015,（12）
• 所属期刊栏目: 疫苗研究
• 页码范围: 1238-1244
• 分类号: R378.99|Q-332
• 语种: 中文

摘要

目的 通过生物信息学软件评价幽门螺旋杆菌(Helicobacter pylori,Hp)尿素酶多表位疫苗CTB-UE的抗原结构,并在E.coli中表达、纯化融合蛋白CTB-UE.方法 应用生物信息学软件DNAstar、Geno3D、MOE分析Hp尿素酶多表位疫苗CTB-UE的二级结构和三级结构;将人工合成的尿素酶多表位肽基因UE插入含CTB基因的重组质粒pETC中,构建重组表达质粒pETCUE,转化E.coli BL21(DE3),经IPTG诱导表达后,通过Ni-NTP镍离子亲和层析纯化重组蛋白CTB-UE,并进行Western blot分析.结果 生物信息学软件分析显示,Hp尿素酶多表位疫苗CTB-UE具有合理的结构;重组表达质粒pETCUE经双酶切和测序鉴定证实,融合基因CTB-UE与设计序列完全一致;表达的融合蛋白CTB-UE相对分子质量约为33 000,主要以包涵体形式表达,表达量占全菌蛋白的22.3％;纯化的融合蛋白CTB-UE纯度达95.6％,可与兔抗Hp多克隆抗体发生特异性结合.结论 设计的Hp尿素酶多表位疫苗CTB-UE具有合理的结构,能在E.coli中高效表达,纯化后纯度较高,且具有较强的反应原性,为进一步研究针对尿素酶A、B双亚基的Hp多表位疫苗奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	奚涛	中国药科大学生命科学与技术学院	138	927	15.0	25.0
2	郭乐	宁夏医科大学颅脑疾病重点实验室	18	39	4.0	5.0
6	秦玉红	宁夏医科大学临床医学院临床病原微生物重点实验室	10	17	3.0	4.0
7	刘昆梅	宁夏医科大学颅脑疾病重点实验室	13	17	3.0	3.0