旋毛虫Hsp70与Ts87融合蛋白的构建表达及鉴定

• 作者: 孙青 孙靓 房磊 杨静 毕阔 诸欣平 顾园
• 来源期刊: 寄生虫与医学昆虫学报
• 关键词: 旋毛虫 融合蛋白 热休克蛋白70 排泄分泌抗原 疫苗
• 年，卷（期）: 2015,（1）
• 所属期刊栏目: 著述
• 页码范围: 1-6
• 页数: 6页
• 字数: 4082字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-0507.2015.01.001

摘要

本文构建并表达了旋毛虫热休克蛋白70（Ts－Hsp70）与排泄分泌抗原Ts87的融合蛋白，并对融合蛋白进行纯化和免疫学鉴定。本研究采用限制性内切酶EcoRⅠ酶切位点将目的基因Ts－Hsp70与Ts87相连接，插入pET28－a （＋）质粒，转入大肠埃希菌BL21（DE3）中诱导表达、纯化，获得的融合蛋白rTs－Hsp70－Ts87用Western blot的方法鉴定。经PCR、酶切鉴定、测序分析，结果显示，目的基因片段大小为2721 bp，构建的重组质粒与预期相符。经IPTG诱导表达，通过镍离子柱层析纯化复性后得到可溶的融合蛋白rTs－Hsp70－Ts87，其相对分子质量约为100 kDa； Western blot结果显示，该蛋白可被抗His标签单抗、 rTs－Hsp70免疫血清、 rTs87免疫血清识别。以上结果表明，本研究成功构建并表达了融合蛋白rTs－Hsp70－Ts87，为进一步研究rTs－Hsp70－Ts87的免疫保护性，开发新的有效抗旋毛虫病的疫苗奠定基础。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	杨静	首都医科大学基础医学院人体寄生虫学教研室	116	764	15.0	22.0
2	诸欣平	首都医科大学基础医学院人体寄生虫学教研室	69	408	11.0	16.0
3	顾园	首都医科大学基础医学院人体寄生虫学教研室	15	105	5.0	10.0
4	毕阔	首都医科大学基础医学院人体寄生虫学教研室	6	5	2.0	2.0
5	孙靓	首都医科大学基础医学院人体寄生虫学教研室	2	4	1.0	2.0
6	孙青	首都医科大学基础医学院人体寄生虫学教研室	3	1	1.0	1.0
7	房磊	首都医科大学基础医学院人体寄生虫学教研室	3	2	1.0	1.0