科尔沁牛乳腺炎临床分离无乳链球菌菌毛岛屿PI-2a辅助蛋白2基因的克隆及序列分析

• 作者: 于辰龙 吴金花 布日额 杜长智 锡林高娃
• 来源期刊: 中国生物制品学杂志
• 学科: 农学
• 关键词: 乳腺炎 牛 无乳链球菌 菌毛岛屿 辅助蛋白2基因 克隆 序列分析
• 年，卷（期）: 2015,（12）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 1269-1273
• 分类号: S855.1+1|Q785
• 语种: 中文

摘要

目的 克隆内蒙古东部地区科尔沁牛乳腺炎无乳链球菌菌毛岛屿PI-2a辅助蛋白2(ancillary protein 2,AP2)基因片段,并进行序列分析.方法 根据GenBank中登录的牛乳腺炎无乳链球菌菌毛岛屿PI-2a AP2基因序列,使用生物信息学软件Primer 5.0设计1对特异性引物,以内蒙古东部地区乳源性无乳链球菌临床菌株总DNA为模板,扩增AP2基因片段,与pMD18-T Vector连接,转化至感受态E.coli JM109中,提取质粒,进行PCR及单、双酶切鉴定;将质粒pMD 18-T-AP2转化感受态E.coli JM109后,利用DNAStar分析测序结果,并对其推导的氨基酸序列进行抗原可及性分析,ProtScale在线程序分析其疏(亲)水性.结果 质粒pMD18-T-AP2经PCR及单、双酶切鉴定,证明构建正确;扩增的AP2基因序列长度为699 bp,编码233个氨基酸残基,与GenBank中登录的无乳链球菌菌毛岛屿PI-2a AP2基因核苷酸序列相似性达99％,有3个碱基出现变异(402:C→A;563:C→T;467:A→T),氨基酸序列有两处出现变异,分别为178氨基酸(V→A)和216氨基酸(E→V);该序列二级结构α螺旋分布C-末端较多,β折叠较丰富,分布较均匀,无规则卷曲分布在两端,亲水性指数相对较高,抗原性较好.结论 成功克隆出内蒙古东部地区科尔沁牛乳腺炎无乳链球菌菌毛岛屿PI-2a AP2基因,为进一步研究AP2基因编码蛋白的抗原性奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	布日额	内蒙古民族大学生命科学学院内蒙古民族大学乳源性致病菌研究所	118	481	13.0	18.0
2	吴金花	内蒙古民族大学生命科学学院内蒙古民族大学乳源性致病菌研究所	41	213	8.0	13.0
3	锡林高娃	内蒙古民族大学生命科学学院内蒙古民族大学乳源性致病菌研究所	25	24	3.0	4.0
4	杜长智	内蒙古民族大学生命科学学院内蒙古民族大学乳源性致病菌研究所	3	1	1.0	1.0
5	于辰龙	内蒙古民族大学生命科学学院内蒙古民族大学乳源性致病菌研究所	3	1	1.0	1.0