NMF308nmf／nmf小鼠耳蜗毛细胞凋亡方式及z－VAD－FMK对毛细胞的保护作用

• 作者: 张敏燕 朱宏亮 朱雯瑾 李白芽 李胜利 王玉虎 郑庆印
• 来源期刊: 听力学及言语疾病杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 老年性聋 外毛细胞 凋亡 抗凋亡抑制剂 动物模型
• 年，卷（期）: 2015,（1）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 50-56
• 页数: 7页
• 分类号: R764.43+6
• 字数: 5926字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1006-7299.2015.01.013

摘要

目的：了解年龄相关性听力损失小鼠耳蜗毛细胞的凋亡方式，探讨半胱氨酸蛋白酶（caspase）抑制剂z－VAD－FMK [z － Val － Ala － Asp （Ome）－ fluoromethylketone]防治老年性聋的效果。方法选用新生NMF308nmf／nmf小鼠14只和成年同窝NMF308nmf／nmf小鼠32只，分为新生小鼠腹腔注射组（14只）、成年小鼠腹腔注射组（14只）和成年小鼠圆窗膜注射组（18只），各组又分为治疗组（注射z－VAD －FM K ）和对照组[注射二甲基亚枫（dimethylsulfoxide ，DMSO）]，采用圆窗膜局部和腹腔注射两种方法给药，给药前后行ABR检测，用免疫荧光染色化学技术TUNEL、caspase－3和PI（碘化丙啶）染色标记耳蜗毛细胞，观察各组耳蜗毛细胞的凋亡和存活状况。结果NMF308nmf／nmf小鼠从1月龄开始发生听力减退和毛细胞功能改变，到2月龄时，caspase－3激活表达的毛细胞凋亡现象是毛细胞凋亡出现的最早表现；TUNEL阳性标记特征稍晚出现；PI标记可见毛细胞细胞核固缩和碎片出现的时间从2月龄开始；到3月龄时该种小鼠听力基本丧失，耳蜗毛细胞严重缺失；而应用z－VAD －FM K治疗后，各治疗组小鼠ABR反应阈明显好于对照组；耳蜗毛细胞凋亡数目较对照组减少，存活数明显较对照组多，尤以圆窗膜注射组明显。结论 NMF308nmf／nmf小鼠耳蜗毛细胞的死亡方式以caspase－3凋亡途径为主，应用caspase－3抑制剂z－VAD －FM K定向内耳给药，可以阻断caspase－3信号途径激活所导致的毛细胞凋亡，从而有效防治老年性聋。