家蚕丝素重链C末端序列分析、克隆及表达纯化

• 作者: 何华伟 刘莉娜 刘青松 李珍珍 李瑜 王叶菁
• 来源期刊: 蚕学通讯
• 关键词: 家蚕 丝素重链 C末端 克隆 表达纯化
• 年，卷（期）: 2015,（2）
• 所属期刊栏目: 试验简报
• 页码范围: 1-6
• 页数: 6页
• 字数: 3497字
• 语种: 中文

摘要

蚕丝主要由丝素和丝胶蛋白组成，其中丝素包括丝素重链，丝素轻链和 P25蛋白。丝素重链蛋白分子量大，体外表达困难，难以分离纯化，很难对其结构进行研究。本文通过对丝素重链基因的分析，以家蚕5龄3d后部丝腺cDNA为模板，克隆获得了丝素重链C末端碱基序列，并将其构建到pET‐50b（＋）表达载体上，转入到大肠杆菌中进行表达，通过镍柱亲和层析纯化获得了丝素重链C末端的融合蛋白，为进一步研究蚕丝蛋白的折叠和组装奠定了研究基础。