水貂肠炎病毒SYBR GreenⅠ荧光定量PCR检测方法的建立

• 作者: 于永乐 单虎 张传美 张洪亮 杨海燕 杨瑞梅
• 来源期刊: 兽类学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 水貂肠炎病毒 SYBR GreenⅠ 荧光定量PCR
• 年，卷（期）: 2015,（1）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 102-109
• 分类号: Q16
• 语种: 中文

摘要

根据GenBank登录的水貂肠炎病毒(MEV) VP2蛋白基因的保守序列设计了1对特异性引物,经PCR扩增出146 bp的目的片段,并克隆到pMD 18-T载体上,提取重组质粒经PCR及测序鉴定正确后,以10倍梯度稀释质粒作为阳性标准品,绘制荧光定量标准曲线,以此建立一种基于SYBR Green荧光染料的定量PCR特异性检测水貂肠炎病毒的方法.结果表明:该方法对MEV有很好的特异性,检测灵敏度为34拷贝/μL,且重复性试验变异系数均小于2％.临床检测中,在80份样品中检测到30份阳性样品,高于普通PCR和电镜观察方法的检出率.该方法的建立实现了对MEV临床早期快速诊断和定量分析,为毛皮动物MEV的防控提供了可靠的检测方法.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	单虎	青岛农业大学山东省预防兽医学重点实验室	183	631	12.0	17.0
2	张传美	青岛农业大学山东省预防兽医学重点实验室	32	92	6.0	9.0
3	杨海燕	青岛农业大学山东省预防兽医学重点实验室	28	95	6.0	9.0
4	杨瑞梅	青岛农业大学山东省预防兽医学重点实验室	26	85	6.0	8.0
5	于永乐	青岛农业大学山东省预防兽医学重点实验室	3	9	2.0	3.0
6	张洪亮	青岛农业大学山东省预防兽医学重点实验室	16	66	6.0	7.0