鲤鱼肌肉Ⅴ型胶原蛋白的分离纯化及其抗体制备

• 作者: 刘光明 张凌晶 徐超 曹敏杰 蔡秋凤 鲍俊旺
• 来源期刊: 集美大学学报（自然科学版）
• 学科: 生物学
• 关键词: V型胶原蛋白 圆二色谱 多克隆抗体 免疫印迹法 鲤鱼
• 年，卷（期）: 2015,（6）
• 所属期刊栏目: 水产、食品与生物技术
• 页码范围: 401-406
• 页数: 6页
• 分类号: Q512+.6
• 字数: 4194字
• 语种: 中文

摘要

通过酸溶、胃蛋白酶酶解和氯化钠盐析等方法，从鲤鱼肌肉中纯化得到了 V型胶原蛋白． SDS－PAGE电泳图谱分析发现，其至少由2条α链（α1和α2）组成，其中α1分子质量约为135 ku，α2分子质量约为120 ku．通过圆二色光谱仪分析其二级结构，发现其具有胶原蛋白三股螺旋结构的典型特征，其热变性温度为30?5℃．将V型胶原蛋白作为抗原免疫新西兰大白兔，成功制备了多克隆抗体．采用免疫印迹法对该多克隆抗体的特异性进行分析，证明其仅与鱼类V型胶原蛋白产生反应，特异性良好．