miR-17-5p 通过靶定 PTEN 调节结肠癌细胞增殖、侵袭和迁移能力的研究

• 作者: 任妮丽 吴方毅 胡俊华
• 来源期刊: 解放军医药杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 微RNAs 结肠肿瘤 细胞增殖 PTEN 磷酸水解酶
• 年，卷（期）: 2015,（7）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 56-62
• 页数: 7页
• 分类号: R342.2|R735.35
• 字数: 3771字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.2095-140X.2015.07.015

摘要

目的：探讨 miR-17-5p 对结肠癌细胞增殖、侵袭及迁移能力的影响,以及 miR-17-5p 靶基因的确定及功能。方法实时定量聚合酶链反应(PCR)检测结肠癌组织和癌旁组织中 miR-17-5p 的表达情况。将 miR-17-5p 类似物(mimics)和 miR-17-5p 反义寡核苷酸(ASO)以及对照质粒分别转染 SW620和 SW480细胞系,通过噻唑蓝(MTT)比色法和克隆形成能力检测细胞的增殖能力,利用 Transwell 小室检测细胞的体外侵袭和迁移能力。利用生物信息学预测 miR-17-5p 的靶基因,并应用荧光报告载体,实时定量 PCR 和 Western blot 方法对靶基因进行验证。最后将靶基因的过表达质粒 pcDNA3/ PTEN 转染细胞,检测细胞的增殖、体外侵袭和迁移能力。结果与癌旁组织相比,miR-17-5p在癌组织中表达增高(P <0．01)；转染 miR-17-5p 后,SW620和 SW480细胞活性、克隆形成能力、侵袭和迁移能力与对照组相比显著增强(P <0．01),ASO 封闭 miR-17-5p 表达后,SW620和 SW480细胞活性、克隆形成能力、侵袭和迁移能力下降(P <0．01)。过表达 miR-17-5p 可以抑制含 miR-17-5p 结合位点荧光报告载体的强度(P <0．01),将结合位点突变后抑制作用则显著减弱。过表达 miR-17-5p 可以同时在 mRNA 和蛋白水平上抑制 PTEN 的表达(P <0．01),而用ASO 封闭 miR-17-5p 的表达后 PTEN 的表达则升高(P <0．01)。细胞转染过表达 PTEN 的质粒后,SW480和 SW620细胞活性、克隆形成能力、侵袭和迁移能力减弱(P <0．01)。结论 PTEN 是 miR-17-5p 的直接靶基因,miR-17-5p 通过抑制 PTEN 的表达而促进结肠癌细胞的增殖、侵袭和迁移。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	任妮丽	湖北医药学院附属人民医院医务处	12	30	3.0	4.0
2	吴方毅	湖北医药学院附属人民医院消化内科	12	36	4.0	4.0
3	胡俊华	湖北医药学院附属人民医院消化内科	15	78	6.0	8.0