来源于枯草芽孢杆菌的漆酶cotA基因克隆与表达及其酶学性质研究

• 作者: 伍宁丰 余小霞 刘晓青 田健
• 来源期刊: 中国农业科技导报
• 学科: 生物学
• 关键词: 漆酶 微好氧发酵 基因克隆 基因表达
• 年，卷（期）: 2015,（1）
• 所属期刊栏目: 生物技术 生命科学
• 页码范围: 102-108,121
• 页数: 8页
• 分类号: Q78
• 语种: 中文
• DOI: 10.13304/j.nykjdb.2014.415

摘要

漆酶作为一种含铜离子的多酚氧化酶,在环境保护、生物能源、食品工业和纸浆漂白等工业中有重要的应用价值.从枯草芽孢杆菌168菌株中克隆漆酶cotA基因,全长1 542 bp,编码513个氨基酸,外加一个终止密码子.将该基因在大肠杆菌Transetta(DE3)菌株中通过微好氧发酵法进行异源表达和纯化,获得的重组酶蛋白CotA的最适反应温度为60℃,最适pH为4.5.该酶在60℃具有较好的热稳定性,保温90 min后仍有71.70％的剩余酶活.最适反应条件下,重组酶对ABTS的Km为63.9±5 μmol/L,kcat为39.1± 1/s,最大反应速率为0.005 μmol/L· min· mg,且在最适反应条件下,微好氧发酵法获得的重组酶蛋白CotA的比活(557.8 U/mg)是低温诱导法(0.2 U/mg)的2 655.4倍.因此,通过微好氧发酵法可以显著提高重组漆酶CotA的比活力.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	伍宁丰	中国农业科学院生物技术研究所	56	1134	18.0	33.0
2	田健	中国农业科学院生物技术研究所	27	179	7.0	12.0
3	刘晓青	中国农业科学院生物技术研究所	3	51	1.0	3.0
4	余小霞	中国农业科学院生物技术研究所	3	62	2.0	3.0