枯草芽孢杆菌QM11漆酶基因克隆表达及序列分析

• 作者: 徐伟 由庆
• 来源期刊: 食品工业科技
• 学科: 工学
• 关键词: 枯草芽孢杆菌 漆酶 基因克隆 序列分析 表达载体构建 诱导表达
• 年，卷（期）: 2016,（6）
• 所属期刊栏目: 生物工程
• 页码范围: 225-228
• 分类号: TS201.1
• 语种: 中文
• DOI: 10.13386/j.issn1002-0306.2016.06.038

摘要

为获得高效表达的产漆酶工程菌,将枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)的漆酶(cotA)基因在大肠杆菌中表达.用PCR的方法从枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)QM11基因组中扩增cotA基因,连接载体pET22b构建成表达载体pET22b-cotA,转化至E.coli BL21(DE3)进行诱导表达,最终通过SDS-PAGE检测蛋白表达情况.克隆得到的cotA基因含有1542个核苷酸,由513个氨基酸组成,预测相对分子量为58 ku,理论等电点为5.91,无信号肽,二级结构以B-折叠和无规卷曲为主,其中β-折叠占26.71％,无规卷曲占52.05％,与NCBI已公布的Bacillus subtitis漆酶cotA基因(GenBank:GQ 184294.1)碱基序列有12个碱基的差异,其编码的氨基酸序列有4个发生了改变.通过SDS-PAGE检测,目标蛋白相对分子质量约为54 ku,与预测相对分子量基本相符.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	徐伟	哈尔滨商业大学食品工程学院	45	205	8.0	12.0
2	由庆	哈尔滨商业大学食品工程学院	6	8	2.0	2.0